①项，死细胞的原生质层不具有选择透过性，无法再发生质壁分离现象，故正确。

②项，根尖分生区的细胞没有形成中央大液泡，也无法观察质壁分离现象，故正确。

③项，由于细胞液浓度小于硝酸钾溶液浓度，因此细胞一开始无法大量吸水，故错误。

④项，若细胞大量失水，则会出现质壁分离现象，与题意不符合，故错误。

⑤项，由于细胞液浓度小于硝酸钾溶液浓度，因此细胞渗透失水，发生质壁分离现象；与此同时，随着K+和NO3-不断通过主动运输的方式进入细胞，使得细胞液浓度大于外界硝酸钾溶液浓度，此时细胞开始渗透吸水，发生质壁分离复原现象，此时有可能无法观察到质壁分离现象，故正确。

综上所述，因为①②⑤正确，③④错误，所以，本题正确答案为B。