下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。据图回答相关问题：
25.人工授精时卵子要发育到________________期才能与精子结合，受精的标志是________________；从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用，其获能的方法有培养法和___________法。
26.为了获得更多的早期胚胎，常用____________激素对供体进行处理
27.在牛体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用________________酶处理。
28.在体外培养受精卵时，除了给予一定量的氧气以维持细胞呼吸外，还需要提供二氧化碳气体以维持________，图中过程A称为________。
29.如暂时不进行A过程，通常在________条件下保存早期胚胎。
正确答案
减数第二次分裂中期 在卵细胞膜和透明带间出现两个极体 化学（诱导）
解析
人工授精时卵子要发育到减数第二次分裂中期期才能与精子结合，受精的标志是在卵细胞膜和透明带间出现两个极体；从良种公牛采集的精子需获能后才能进行受精作用，其获能的方法有培养法和化学（诱导）法。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
受精标志
正确答案
促性腺
解析
为了获得更多的早期胚胎，常用促性腺激素对供体进行处理
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
激素的应用
正确答案
接触抑制 单层（或一层） 胰蛋白（或胶原蛋白）
解析
在牛体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。此时，瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理。
考查方向
本题主要考查了动物细胞培养的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
贴壁抑制
正确答案
（培养液/基的）pH 胚胎移植
解析
在体外培养受精卵时，除了给予一定量的氧气以维持细胞呼吸外，还需要提供二氧化碳气体以维持（培养液/基的）pH，图中过程A称为胚胎移植。
考查方向
本题主要考查了胚胎移植技术的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
二氧化碳作用
正确答案
冷冻（或超低温、液氮、零下196℃）
解析
冷冻（或超低温、液氮、零下196℃）条件下保存早期胚胎。
考查方向
解题思路
结合知识分析题干完成
易错点
条件错误