(选做题一)请回答下列与微生物有关的问题:
58.土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生脲酶,该酶能将尿素分解成 。
59.为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基 (成分见下表):
KH2PO4
NaH2PO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
琼脂
尿素
水
甲
+
+
+
+
-
+
+
乙
+
+
+
-
+
+
+
注:“+”表示有,“-”表示无
培养基甲 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是 ;培养基乙 (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌,原因是 。
60.如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、370,则每升原水样中该细菌数为 。
61.纯化细菌时使用的培养基一般用 法灭菌, (填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。
62.某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是 。
63.尿素分解菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的 (填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”)。
NH3和CO2(或“氨气和二氧化碳”)(2分)
土壤中具有分解尿素的细菌,此类细菌能产生脲酶,该酶能将尿素分解成NH3和CO2 (或氨气和二氧化碳)
土壤中具有分解尿素的细菌,它体内的脲酶能够将土壤中的尿素分解为氨,尿素被分解后才能被植物吸收利用
不能 液体培养基不能用于分离单菌落(2分) 不能 培养基中没有葡萄糖,不能为细菌提供碳源(2分)
由表可知,培养基甲没有加入琼脂作为凝固剂,属于液体培养基,液体培养基不能用于分离单菌落,所以培养基甲不能用来分离和鉴别尿素分解菌;培养基乙中没有葡萄糖,不能为细菌提供碳源,因此也不能用来分离和鉴别尿素分解菌
筛选尿素分解细菌,需要使用以尿素为唯一氮源的固体培养基,在这种培养基中加入酚红指示剂,细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,PH增高,使指示剂变红。
1.58×108(2分)
稀释涂布法中,一般选择30-300个菌落进行计数,因此一般没生原水样中该细菌数:(161+155+158)÷3÷0.1×1000×102=1.58×108
统计菌落数目的方法:稀释涂布平板法的计算方法=(C÷V)×M
高压蒸汽灭菌 不可
纯化细菌是使用的培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌;由于抗生素能够杀死细菌(目的菌),因此不可用加入抗生素的方法防止杂菌感染
注意灭菌与消毒的区别,常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌
将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(2分,答案合理可得分)
某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
培养小型菌落用平板画线法,掌握它的具体操作要领
甘油
尿素分解菌在-20℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的甘油
微生物长期保存的方法