某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。
20.根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______(填“能”或“不能”),原因是___________________________。
21.培养基用_________方法灭菌,培养皿用____________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止__________,以免造成污染。
22.要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用__________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。
23.培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。
24.实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。
(1)不能 培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)
(1)分离土塘中分解尿素的细菌尿素应为唯一氮源,配方中蛋白胨也是氮源。
重视微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关基础知识。
微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关知识较为薄弱。
(2)高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 培养皿盖上的水珠落入培养基
(2)培养基一般用高压蒸汽灭菌;培养皿耐高温可以采用干热灭菌;培养基温度过低会凝固,所以在50℃左右开始倒平板;倒平板时要无菌操作,一般在酒精灯火焰处操作;培养基倒置能防止培养皿盖上的水珠落入培养基。
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微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关知识较为薄弱。
(3)(稀释)涂布平板 菌落数目
(3)“活”菌数目,说明应采用稀释涂布平板计数法;一般认为每个细菌能增殖为一个菌落,根据菌落数目即可统计活菌数目。
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(4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生
(4)检测培养基是否被污染的方法一般是:将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生。
重视微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关基础知识。
微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关知识较为薄弱。
(5)灭菌
(5)为防止微生物的扩散,应灭菌后才能丢弃。
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微生物培养、无菌操作、微生物计数的相关知识较为薄弱。