[生物——选修3：现代生物科技专题]
回答有关基因工程的问题：
构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生  末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生  （相同，不同）粘性末端的限制酶。
利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是  。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca²+处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为  。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成  ，常用  杂交技术。
如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的  中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的  上。